货号: abs60285
产品介绍
DNA CeLL Kit是专门用于从各种细胞样本中提取基因组DNA的试剂盒。提取的样本范围包括各种培养细胞、针刺吸取物、尿沉渣细胞等细胞离散标本。它采用复合消化液消化细胞中的蛋白质,使细胞DNA更容易释放出来,因而本试剂盒DNA提取产率较高。它采用了新的离子膜技术并反复优化了裂解液和洗脱液配方,提取得到的DNA纯度更高,有效地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于PCR、荧光定量PCR和各种酶切试验等。
产品特点
1.操作简便快速,可在20分钟内完成提取过程;
2.提取DNA纯度高,无抑制剂,A260/A280为1.7-1.9;
3.产率高,同样的样本量提取的DNA更多;
4.标本范围宽,适合于各种培养细胞、针刺吸取物、尿沉渣细胞等细胞离散标本
使用方法
展开剩余75%操作步骤 (请自行准备无水乙醇、异丙醇、灭菌 1.5mL 离心管):
1.取出洗涤液,按以下操作:
a) 洗涤液 A:按终浓度 30%比例加入无水乙醇,如 7mL 加入 3mL 无水乙醇;21mL 加入 9mL 无水乙醇,充分混匀。 b) 洗涤液 B:按终浓度 70%比例加入无水乙醇,如 3mL 加入 7mL 无水乙醇;9mL 加入 21mL 无水乙醇,充分混匀。2.取 1.5mL 离心管,加入 200μL 细胞样本,再加入 200μL 裂解液及 20μL 消化液,振荡混匀,65℃水浴 10 分钟。
[如需除去 RNA,可在加入裂解液后先加入 20μL DNase –Free RNase A,振荡混匀,室温放置 5 分钟。再加入 20μL 消化液,振荡混匀,65℃水浴 10 分钟。]
3.加入 200μL 异丙醇(总体积的 30%),混合均匀,如有半透明悬浮物,不影响 DNA 的提取与后续实验。
4.将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内,12,000 rpm 离心 1 分钟,弃收集管内废液;
5.将吸附柱放回收集管内,加 500μL 洗涤液 A 至吸附柱内,静置 2 分钟,12,000 rpm 离心 1 分钟,弃收集管内废液。
6.将吸附柱放回收集管内,加 500μL 洗涤液 B 至吸附柱内,12,000 rpm 离心 1 分钟,弃收集管内废液。
7.按每份样本 40μL 取洗脱液(如 10 份提取样本,即取 400μL 洗脱液),放置于灭菌 1.5mL 离心管,65℃预热。
8.将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 离心 2 分钟,离去残留的洗涤液。
9.取出吸附柱,放入新的 1.5 mL 灭菌离心管内,在吸附柱中心加入 40 μL 预热洗脱液,静置 2 分钟,12,000 rpm 离心 1 分钟,收集 DNA 溶液。提取的 DNA 即可用于下一步实验或-20℃保存
储存/保存方法
室温(10-30℃)保存,消化液-20 ℃存放,避免反复冻融,有效期1年
技术指标
试剂盒组成:
组份50T100T吸附柱和收集管各 50 个各 100 个裂解液11mL22 mL洗涤液 A21mL42 mL洗涤液 B9 mL18 mL洗脱液2.2mL4.4 mL消化液1.1mL2.2 mL说明书1 份1 份
注意事项
注意:1、裂解液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。
2. 洗涤液在使用前应加入乙醇后充分混匀,最好现用现配,每次根据所要提取的样本量计算后适量配制。
3. 所用细胞量建议不高于 10^7
本产品经严格的质量检验证明,无生物污染,避免反复冻融,
温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
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